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      Bio-techne|「資深玩家」適用的 DuoSet? ELISA,選對「輔助」很重要

      Bio-Techne 的 ELISA 試劑盒家族陣容強大,簡直是神仙打架:既有享譽業界的金標準 Quantikine® 系列,又有性價比之王 Valukine® 系列,還有為 ELISA 高手量身打造的 DuoSet® 系列。

      一、DIY 你的專屬 ELISA 試劑盒

      說起 DuoSet® 系列,其屬于開發型 ELISA 試劑盒,適合動手能力強、經驗豐富的 ELISA「資深玩家」,特別適用于在各種不同平臺上進行免疫學實驗開發設計,為研究者提供極為經濟、靈活、快捷的方案。DuoSet® ELISA 試劑盒的組分包括:捕獲抗體、生物素化檢測抗體、校正的蛋白標準品、鏈霉親和素偶聯的辣根過氧化物酶(Streptavidin-HRP)。

      與包含 ELISA 實驗所有必需試劑的即用型 Quantikine® ELISA 試劑盒不同,DuoSet® ELISA 試劑盒驗證了細胞培養上清的樣本,如需檢測含有復雜基質的樣本(如血清和血漿等),則需要進一步優化。

       

      二、如何選擇 DuoSet 的黃金搭檔

      那么要順利開展完整的 ELISA 實驗,DuoSet® ELISA 試劑盒需要搭配哪些附屬試劑?我們的產品說明書提供了詳細信息。

      在說明書的「Other Materials & Solutions Required」部分,會提示需要搭配哪些試劑,產品頁面也會給出建議搭配的附屬試劑(請參考下圖)。大部分 DuoSet® ELISA 試劑盒可以直接購買成套的輔助試劑盒,例如 DY007、DY008、DY009 等。

      如果你有較長時間的 ELISA 開發經驗,可自行配制一套合適的附屬試劑。如果你是初次接觸 DuoSet® ELISA 試劑盒,附屬試劑的配制又稍顯繁瑣,這時我們還是推薦使用 DY007、DY008 或 DY009 作為起步,因為這些附屬試劑盒均已經過驗證,適用于 ELISA 實驗。

       

      此外附屬試劑盒的組分也可單獨出售。例如:DY008 由以下試劑組成,每種試劑均可單獨購買:

      • ELISA Plate-Coating Buffer,DY006;
      • Stop Solution,DY994;
      • Substrate Reagent Pack (8 vials Color A, 8 vials Color B),DY999;
      • Wash Buffer Concentrate,WA126;
      • Clear Polystyrene Microplates,25 pack,DY990;
      • ELISA Plate Sealer,100 Pack,DY992;
      • Reagent Diluent Concentrate 2 (10X, 5x21 mL),DY995。
         

      為什么有必要提及附屬試劑?我們舉個來自用戶的例子,體現附屬試劑的重要性:

      下表中顯示,用戶使用 cat# DY450:Mouse CCL3/MIP-1 alpha DuoSet ELISA 和自行組配的附屬試劑,得到的標準品 OD 值(450 nm 的測定值減去 570 nm 的測定值)??梢钥吹?,全部標準品 OD 值(包括未加標準品 0 值孔)均出現高的顯色,無梯度。

       

      經過問題排查,我們推測可能是附屬試劑牛血清白蛋白(BSA)造成的影響。實際上,幾乎所有的 BSA 制劑中都會發現不同程度的雜質,例如蛋白酶、結合蛋白、可溶性受體或其他干擾物質,會抑制或干擾某些分析物的檢測。

      我們推薦使用 fraction V(第五組分),無蛋白酶的 BSA,例如 Reagent Diluent Concentrate 1 或 2(貨號 DY995,DY997)。后續用戶使用 DY008 附屬試劑盒替代之前的附屬試劑,重新實驗,結果恢復正常。

      不僅是 BSA,任何一種附屬試劑出現問題,都可能對 ELISA 結果造成極大的影響。所以,如果您希望盡快的開展 DuoSet®  ELISA 實驗,推薦以 DY007、DY008、DY009 為起點開始嘗試,一步步進階大神。

       

      以上文字和圖片來源于Bio-techne

       

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